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從組織塊到高質(zhì)量懸液:詳解單細(xì)胞制備儀在鼠肺樣本前處理中的細(xì)胞解離方案

更新時間:2025-12-02   更新時間:2025-12-02   點擊次數(shù):131次

  如何從小鼠肺組織這一結(jié)構(gòu)復(fù)雜、細(xì)胞脆性高的器官中,高效、穩(wěn)定地制備出高活性、高得率的單細(xì)胞懸液?傳統(tǒng)的人工研磨聯(lián)合酶消化方案,常因操作不一致、力度不均導(dǎo)致細(xì)胞活性驟降,且批次間差異顯著,已成為制約下游單細(xì)胞測序等高精度研究的技術(shù)瓶頸。而借助上海凈信單細(xì)胞懸液制備儀的標(biāo)準(zhǔn)化流程操作,能夠?qū)崿F(xiàn)對小鼠肺組織的溫和解離,顯著提升懸液質(zhì)量與實驗效率,為后續(xù)實驗提供堅實可靠的細(xì)胞起點。


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  實驗材料:健康小鼠一只、解剖工具一套、單細(xì)胞懸液制備儀一臺、消化液1瓶、終止液1瓶、1XPBS 1瓶 、70um濾網(wǎng)1個、離心機(jī)1臺;流式細(xì)胞儀用于活率檢測


  實驗?zāi)康模?/span>通過單細(xì)胞懸液制備儀的標(biāo)準(zhǔn)化操作,實現(xiàn)小鼠肺組織的高效解離,獲得無明顯組織碎片、細(xì)胞粘連少的單細(xì)胞懸液,同時較大限度地保留細(xì)胞活性(目標(biāo)活率≥95%),為后續(xù)流式細(xì)胞分析、單細(xì)胞測序、細(xì)胞功能檢測等實驗提供合格樣本,解決傳統(tǒng)手動制備方法中 “細(xì)胞活率低、純度差、重復(fù)性弱" 的痛點。


  小鼠肺組織細(xì)胞懸液制備的實驗步驟:


  1、選取健康小鼠1只,斷頸處死,打開腹腔,取出肺器官


  2、用1XPBS洗滌肺器官


  3、選取28.5mg肺組織,用眼科剪剪成糊狀


  4、放入加滿消化液的離心管中


  5、放入單細(xì)胞懸液制備儀的管架上,管架預(yù)熱5分鐘


  6、選擇模塊4進(jìn)行實驗,實驗結(jié)束后儀器自動停止


  7、用70um濾網(wǎng)過濾,加入終止液終止消化(消化液:終止液1:2)


  8、放到離心機(jī)上重懸


  9、重懸后棄掉上清,加入少量PBS打散混勻底部沉淀細(xì)胞


  10、吸取200ul單細(xì)胞懸液,加入PI避光染色10分鐘


  11、后續(xù)進(jìn)行流式分析,細(xì)胞活率為98.67%


  實驗效果:


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  單細(xì)胞懸液制備儀對小鼠肺組織制備的實驗結(jié)果分析:活率98.67%


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  實驗操作注意事項:


  1. 機(jī)器使用時應(yīng)保證位置放置平穩(wěn)


  2. 機(jī)器適于短時、間歇工作,請勿長時間連續(xù)使用,工作時間建議不超過 8 小時。


  3. 為保護(hù)機(jī)器內(nèi)部的電路和機(jī)械,禁止用流水沖洗,而只能用濕布擦拭。


  4. 使用過程中如有任何異常,應(yīng)立即斷電,交由專業(yè)人員處理。


  5. 機(jī)器必須放置在平整的實驗臺上(如果是石質(zhì)臺面更好),以防設(shè)備工作時振動。


  6. 一定要時刻保持警惕狀態(tài),請一切檢查好之后再開啟動!


  從實驗結(jié)果來看,借助單細(xì)胞懸液制備儀的精準(zhǔn)控溫與標(biāo)準(zhǔn)化消化模塊,最終獲得的小鼠肺組織單細(xì)胞懸液活率高達(dá) 98.67%,遠(yuǎn)超手動制備(通常活率 80%-90%),且懸液中無明顯組織碎片,滿足流式分析對樣本純度與活性的嚴(yán)苛要求。這一實驗結(jié)果印證了單細(xì)胞懸液制備儀在動物組織單細(xì)胞處理中的核心價值 —— 它不僅通過管架預(yù)熱、專屬模塊設(shè)置簡化了操作流程,還避免了人為操作差異導(dǎo)致的實驗誤差,讓肺組織單細(xì)胞懸液制備從 “依賴經(jīng)驗" 轉(zhuǎn)向 “標(biāo)準(zhǔn)化可控"。

                                                       

  無論是基礎(chǔ)科研中的細(xì)胞表型分析,還是臨床前研究中的肺臟疾病機(jī)制探索,單細(xì)胞懸液制備儀都能為高質(zhì)量樣本制備提供穩(wěn)定支持,成為提升實驗效率與數(shù)據(jù)可靠性的關(guān)鍵工具。

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